成分測(cè)定

　　水分照水分測(cè)定法測(cè)定，不得過(guò)9.0%。

　　膽酸

　　取本品細(xì)粉約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)?0%氫氧化鈉溶液10ml，加熱回流2小時(shí)，冷卻，加稀鹽酸19ml調(diào)節(jié)pH至酸性，用醋酸乙酯提取4次(25ml、25ml、20ml、20ml)，每次醋酸乙酯液均通過(guò)同一鋪有少量無(wú)水硫酸鈉的脫脂棉濾過(guò)，合并提取液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

　　另精密稱取在105℃干燥至恒重的膽酸對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含0.48mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

　　照薄層色譜法試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液2μl、對(duì)照品溶液1μl與3μl，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以異辛烷-醋酸丁酯-冰醋酸-甲酸(8：4：2：1)為展開(kāi)劑，展至14～17cm，取出，晾干，噴以30%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰，取出，在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，照薄層色譜法進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λ<[S]>=380nm，λ<[R]>=650nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算，即得。

　　本品按干燥品計(jì)算，含膽酸(C24H40O5)不得少于4.0%。

　　膽紅素

　　對(duì)照品溶液的制備，取膽紅素對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加氯仿溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，即得(每1ml中含膽紅素0.01mg)。

　　標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精密量取對(duì)照品溶液1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，置具塞試管中，分別加乙醇至9ml，各精密加重氮化溶液(甲液：取對(duì)氨基苯磺酸0.1g，加鹽酸1.5ml與水適量使成100ml。

　　乙液：取亞硝酸鈉0.5g，加水使溶解成100ml，置冰箱內(nèi)保存。

　　用時(shí)取甲液10ml與乙液0.3ml，混勻)1ml，搖勻，于15～20℃暗處放置1小時(shí)，以相應(yīng)的試劑為空白，照分光光度法，在533nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

　　測(cè)定法取本品細(xì)粉約10mg，精密稱定，置錐形瓶中，加氯仿和乙醇(7：3)的混合溶液60ml、鹽酸1滴，搖勻，置水浴上加熱回流約30分鐘，放冷，移至100ml棕色量瓶中。

　　容器用少量混合溶液洗滌，并入量瓶中，加上述混合溶液至刻度，搖勻。

　　精密量取上清液10ml，置50ml棕色量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻。

　　精密量取3ml，置具塞試管中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下的方法，自加乙醇至9ml起，依法測(cè)定吸收度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中膽紅素的重量(mg)，計(jì)算，即得。

　　本品按干燥品計(jì)算，含膽紅素(C33H36N4O6)不得少于35.0%。