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免疫固定電泳在多發性骨髓瘤中的應用價值

  目的 通過免疫固定電泳法實驗檢測M蛋白并討論此方法對骨髓瘤診斷的意義。方法 對40例被建議做免疫固定的患者用Sebia電泳儀測血清M蛋白。結果 40例標本中有25例患者免疫固定電泳出現重鏈伴輕鏈成分,經25例患者病歷的調查發現其中18例被確診為多發性骨髓瘤。結論 免疫固定電泳對多發性骨髓瘤的診斷具有重要意義。

  多發性骨髓瘤是一種源于前B細胞的骨髓漿細胞惡性增殖性疾病 ,惡性漿細胞分泌大量的單克隆免疫球蛋白,又名副蛋白,M蛋白。一般來說,它可以分為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE、游離輕鏈(Kappa或Lamda)及游離重鏈等7型 。電泳后,它可呈現出一條有特征性的帶(M)。骨髓瘤的患者多以骨病、腎病等繼發病就診,常被誤診為骨折、腎小球腎炎等疾病。據不同醫院統計資料分析,誤診率可達54%~69.1% ,個別醫院甚至高達100% ,誤診時間短則數月,長則年余,因此許多患者錯過了最佳治療時期,本實驗旨在說明免疫固定電泳對多發性骨髓瘤早期診斷和鑒別診斷的意義。

  1.2 方法 加樣:取血清10μl點樣(配套的點樣梳)于pH8.8、0.1的瓊脂糖凝膠板(2人份或4人份)上加樣5min,在20W的恒定電流下進行直到42Vh 為止,20℃恒溫由Peltier系統控制(約9min)。加抗血清:在每份標本的6個電泳區域上各加固定溶液40μl,抗IgG、IgA、IgM、抗 κ、λ(游離和結合)型血清各25μl。然后由機器進行孵育、烘干。染色:先用pH8.8的堿性溶液沖洗膠板3min,然后用紫酸染色,用1‰冰醋酸褪色,烘干。接著又染色,褪色,再褪色,烘干。完畢后觀察結果。

  2 結果

  應用HYDYASYS電泳儀對40例血標本進行免疫固定,其中25例出現重鏈伴輕鏈成分。收集此25例的病歷其中18例臨床診斷為多發性骨髓瘤,3例拒做骨穿未確診,2例確診前轉院,2例尚未確診。25例患者的免疫電泳分型結果見表1。

  3 討論

  多發性骨髓瘤是一種克隆細胞無控制地積聚的腫瘤。對于多發性骨髓瘤而言有3項實驗室檢查具有診斷意義:①證實有高濃度單克隆免疫球蛋白或單克隆輕鏈的存在。②發現骨髓中漿細胞異常增多15%;或有骨髓瘤細胞(幼稚漿細胞)存在。③ 骨骼X線檢查證實有溶骨性病變存在。凡有多發性骨髓瘤臨床表現及上述二項陽性即可排除其它疾病而確診為多發性骨髓瘤。其典型表現是骨痛、腎功能損害、貧血及出血現象、高粘滯血癥等。其中骨痛是此病最常見癥狀,此因骨髓瘤細胞分泌細胞因子(白細胞介素-1)、淋巴細胞毒素、腫瘤壞死因子激活破骨細胞,造成骨質疏松病理性骨折而引起。以骨痛為主訴的患者約為65%,在整個病程中出現骨痛者高達88% 以上。但是,能夠引起骨痛的疾病很多如椎間盤突出、腰椎結核、骨腫瘤、甲狀腺功能亢進等,但這些疾病均不能引起M蛋白的出現。骨髓瘤患者的骨骼X線一般表現為彌漫性骨質疏松,基質出現穿鑿樣溶骨性病變以顱骨最為典型 。但對于早期或慢性進展性骨損害來講,X線并不是一種靈敏的方法 ,況且約35%的患者并不是以骨痛為首發癥狀。因此X線對多發性骨髓瘤早期診斷不具特別意義,而對于分泌型的患者來說其基本發病機制就是骨髓中單克隆惡變漿細胞無節制增殖,浸潤,分泌大量單克隆免疫球蛋白損傷正常組織,因此免疫固定必顯示某種單克隆成分過高。本組4例患者并未出現骨損傷但免疫固定電泳出現異常的球蛋白沉淀線,經骨穿后確診為多發性骨髓瘤。據報道少數患者出現局部或泛發骨質硬化對這種病例診斷,免疫固定起著決定性的意義。

  不少患者以腎臟病變為首發表現,如大量蛋白尿、尿素 氮及肌酐升高而就診于泌尿內科。本組3例患者診斷為慢性腎炎、尿毒癥而收住泌尿病房按腎小球腎炎治療。后經我科建議,做免疫固定,出現單克隆M蛋白,配合骨穿確診為多發性骨髓瘤,延緩或阻止患者由前期進入臨床期,為治療爭取了寶貴時間。

  本組還有2例以心臟病就診,經長期各項檢查未查出原發病,后經血清蛋白電泳出現M帶,免疫固定IgGκ型。后診斷為大量輕鏈沉淀于心肌引起心肌淀粉樣變 導致的心臟病。

  骨穿雖是診斷此病的金標準,但因它是局灶性病變,一次骨穿很難查出瘤細胞,況且多發性骨髓瘤患者的瘤細胞形態多種多樣,少部分患者的瘤細胞形態極不典型,很難用常規檢查方法證實為骨髓瘤細胞,而做免疫固定  就比較簡單方便,而且容易判斷結果。

  多發性骨髓瘤多發于老年人,發生率隨年齡增大有增高趨勢,且病死率高達40% 。在我國日趨老齡化的同時,快速準確地診斷顯得日益重要。

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